• page_banner

Nouvelles

Javascript est actuellement désactivé dans votre navigateur.Certaines fonctionnalités de ce site Web ne fonctionneront pas si JavaScript est désactivé.
Inscrivez-vous avec vos détails spécifiques et le médicament spécifique qui vous intéresse, et nous ferons correspondre les informations que vous fournissez avec les articles de notre vaste base de données et vous enverrons immédiatement une copie PDF par e-mail.
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Département des maladies infectieuses, premier hôpital affilié à l'université de Suzhou, ville de Suzhou, province du Jiangsu, 215000 Tél.tumeurs du système digestif avec une survie globale à 5 ans de 14,1 %.De nombreux patients atteints de CHC sont diagnostiqués à un stade avancé, un dépistage précoce est donc essentiel pour réduire la mortalité par CHC.En plus des indicateurs de détection couramment utilisés tels que l'alpha-foetoprotéine sérique (AFP), l'alpha-foetoprotéine réactive à la lectine du cristallin (AFP-L3) et la prothrombine anormale (protéine II induite par la carence en vitamine K, PIVKA-II), les techniques de biopsie liquidienne Il a été démontré qu'il a une valeur diagnostique dans la détection du CHC.Par rapport aux procédures invasives, la biopsie liquidienne peut détecter des métabolites malins circulants.Les techniques de biopsie liquide détectent les cellules tumorales circulantes, l'ADN tumoral circulant, l'ARN circulant et les exosomes et sont utilisées pour le dépistage précoce, le diagnostic et l'évaluation pronostique du CHC.Cet article passe en revue la biologie moléculaire et l'application de diverses techniques de biopsie liquide pour isoler des biomarqueurs prometteurs qui peuvent être des options viables pour l'évaluation précoce du CHC afin d'améliorer le dépistage précoce des groupes de CHC à haut risque.Mots-clés : technique de biopsie liquidienne, carcinome hépatocellulaire, groupe à haut risque.
Le carcinome hépatocellulaire (CHC) est une tumeur maligne courante du tube digestif, se classant sixième parmi les nouveaux cas de tumeurs malignes chez les hommes et les femmes.1 Dans le monde, le cancer du foie est la troisième cause de décès par cancer après le cancer du poumon et le cancer colorectal, représentant 8,3 % des décès liés au cancer de toutes les tumeurs malignes.1 Le pronostic du CHC est étroitement lié au stade au moment du diagnostic.Les principales raisons de la faible survie dans le CHC sont les métastases intrahépatiques, les thrombus tumoraux veineux portes et les métastases à distance excluant la résection, et bon nombre de ces caractéristiques sont déjà présentes chez les patients au moment du diagnostic.
Selon les directives de diagnostic et de traitement, les principaux facteurs de risque de développer un CHC sont la cirrhose du foie, l'infection chronique par le virus de l'hépatite B (VHB) ou le virus de l'hépatite C (VHC), la stéatose hépatique alcoolique et la stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD). ).2 En outre, les facteurs de risque de CHC comprennent la consommation d'aliments contaminés par l'aflatoxine, la schistosomiase, d'autres causes de cirrhose, des antécédents familiaux de cancer du foie, le diabète, l'obésité, le tabagisme et les lésions hépatiques d'origine médicamenteuse.Les groupes à haut risque âgés de 35 et 45 ans devraient subir des contrôles médicaux réguliers.Le dépistage précoce est une stratégie de traitement précoce importante pour améliorer la survie globale des patients atteints de CHC.
Les biomarqueurs tels que l'AFP, l'AFP-L3 et le PIVKA-II sont recommandés pour le dépistage précoce du CHC3,4.Les techniques de biopsie liquide ont montré des résultats prometteurs dans le diagnostic précoce et l'évaluation du traitement.5,6 Des progrès significatifs ont été réalisés dans la biopsie liquide du CHC, qui peut avoir une sensibilité et une spécificité plus élevées que les marqueurs sériques couramment utilisés tels que l'AFP (tableau 1).
L'AFP est un biomarqueur largement utilisé dans le CHC et est actuellement le biomarqueur le plus détaillé largement utilisé pour le dépistage précoce, le diagnostic et l'évaluation de la maladie.Un taux d'AFP constamment élevé est considéré comme un facteur de risque de progression du CHC.7,8 Le taux de détection du petit carcinome hépatocellulaire (sHCC) augmente avec le développement de l'échographie et de la tomodensitométrie, et l'AFP s'est avérée particulièrement insensible à la détection du hHCC dans la pratique clinique.Selon une étude rétrospective multicentrique9, l'AFP positive a été retrouvée dans 46% (616/1338) des cas de CHC et 23,4% (150/641) des cas de sHCC.De plus, les niveaux d'AFP sont élevés chez les patients atteints d'une maladie hépatique chronique et d'une cirrhose.10 Ainsi, l'AFP a un effet de dépistage limité pour le sHCC.11 Selon les Asia-Pacific Clinical Practice Guidelines for Hepatocellular Carcinoma, l'utilisation de l'AFP n'est pas recommandée.12 Les preuves cliniques suggèrent que PIVKA-II est supérieur à l'AFP dans le traitement du CHC et que l'association de PIVKA-II et d'AFP a une valeur diagnostique plus élevée dans le CHC.13 Par rapport à la biopsie tissulaire, la biopsie liquidienne détecte principalement les métabolites associés à la tumeur dans les fluides corporels (sang, salive, liquide pleural, liquide céphalo-rachidien ou urine) et est moins invasive pour les tissus.14 De plus, les biopsies liquides peuvent refléter des caractéristiques malignes non présentes dans le tissu tumoral primaire.15 Les biopsies liquides ne sont pas encore testées en pratique clinique pour tous les types de tumeurs, mais leur potentiel diagnostique dans le cancer retient l'attention des oncologues.16 La biopsie liquidienne peut détecter les cellules tumorales circulantes (CTC), l'ADN tumoral circulant (ADNc), l'ARN libre circulant (ecRNA) et les exosomes.Dans cet article, nous discuterons des caractéristiques, du rôle et de l'application de diverses techniques de biopsie liquidienne dans le dépistage précoce des groupes de CHC à haut risque.
L'ADN extracellulaire (cfDNA) dans des échantillons de sang d'individus sains a été décrit pour la première fois en 1948 par Mandel et al.17 Le cfDNA est un fragment d'ADN acellulaire d'environ 160 à 180 pb de longueur, provenant principalement de lymphocytes et de cellules myéloïdes.L'ADNct est un fragment d'ADN mutant spécifique libéré par les cellules tumorales dans le sang périphérique, qui représente l'information génomique des cellules tumorales après certains processus physiopathologiques, notamment la nécrose, l'apoptose et l'excrétion.La proportion d'ADNc dans l'ADNc total varie considérablement selon le type de tumeur, et les fragments d'ADNc auraient généralement une longueur inférieure à 167 pb.18 L'étude d'Underhill a montré que les fragments de cfDNA sont généralement plus courts que le cfDNA normal.19 Par rapport aux individus en bonne santé, la longueur totale des fragments de cfDNA dans le sang des patients atteints de cancer est plus courte, de sorte que le cfDNA peut être utilisé comme indicateur du dépistage précoce des tumeurs.L'enrichissement de certains sous-ensembles de longueurs de fragments d'ADNc peut améliorer la détection de l'ADNc associé aux tumeurs solides non métastatiques.Des études ont montré que l'ADNct est présent dans plus de 75 % des cancers avancés du pancréas, du côlon, de la vessie, du tube digestif, du foie, des ovaires, du sein, du mélanome et de la tête et du cou.20,21 Cependant, la quantité d'ADNct dans le sang dépend de l'emplacement de la tumeur.22 Dans une étude menée par Bettegoud, les patients atteints de cancer colorectal, du sein, du foie, du poumon et de la prostate présentaient des niveaux plus élevés d'ADNc dans leur sang que les autres cancers.En revanche, chez les patients atteints d'un cancer de la bouche, d'un cancer du pancréas, d'un cancer gastrique et d'un gliome, la concentration d'ADNc dans le sang était plus faible.vingt-et-un
Étant donné que l'ADNc contient les mêmes mutations génétiques que les cellules tumorales primaires, l'ADNc peut être utilisé pour détecter des mutations hétérogènes spécifiques à la tumeur et des changements épigénétiques, notamment la méthylation, l'hydroxyméthylation, les variations d'un seul nucléotide et les variations du nombre de copies.vingt-trois
La méthylation de l'ADN est l'un des changements épigénétiques les plus courants entraînant une répression génique.Par rapport aux cellules normales, il existe des différences dans le niveau global de méthylation du génome des cellules tumorales, en particulier dans la méthylation des gènes suppresseurs de tumeurs, qui peuvent être détectés à un stade précoce, ce qui suggère que des changements dans la méthylation de l'ADN peuvent être un indicateur de détection de la tumorigenèse.Les gènes suppresseurs de tumeurs associés au CHC peuvent être inactivés par la méthylation du promoteur, stimulant ainsi la tumorigenèse.24 La méthylation de l'ADN est un marqueur idéal pour le diagnostic précoce des tumeurs en raison de sa spécificité tissulaire, de sa détectabilité et de son indépendance vis-à-vis de l'âge.De plus, la méthylation de l'ADN est plus courante que les mutations somatiques car il existe plus de régions cibles et plusieurs sites CpG altérés dans chaque région du génome cible.25 En plus de plusieurs sites CpG, un grand nombre de loci hyperméthylés indépendants dans l'ADNct ont été identifiés dans DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 et RGS10.26 Xu et al.La comparaison des échantillons d'ADNc de 1098 patients HCC et de 835 témoins sains a montré que les gènes associés au HCC étaient fortement corrélés avec les signatures de méthylation plasmatiques correspondantes de l'ADNc.25 Sur la base d'analyses en laboratoire, un modèle prédictif a été développé contenant 10 marqueurs de méthylation avec une sensibilité et une spécificité de 85,7 % et 94,3 %, respectivement, et ces marqueurs étaient fortement corrélés à la masse tumorale, au stade tumoral et à la réponse au traitement.Ces résultats indiquent que l'utilisation de marqueurs de méthylation de l'ADNc est très prometteuse dans le diagnostic, la surveillance et le pronostic du CHC.Dans un modèle de méthylation composé de trois gènes méthylés de manière aberrante (APC, COX2, RASSF1A) et d'un miARN (miR203) présenté par Lu et al27, la sensibilité et la spécificité du modèle 27 pour le diagnostic du CHC associé au VHB étaient comparables.80 %.De plus, le modèle pouvait détecter 75 % des patients atteints de CHC non diagnostiqués avec un taux d'AFP de 20 ng/mL.Le gène de la protéine Ras-associated domain family 1A (RASSF1A) est la principale séquence d'ADN répétitive du génome humain.Araujo et al.ont conclu que l'hyperméthylation du promoteur RASSF1A pourrait être un biomarqueur précieux pour le dépistage précoce du CHC et une cible moléculaire potentielle pour la thérapie épigénétique.28 Dans une étude, une hyperméthylation du promoteur RASSF1A sérique a été trouvée chez 73,3 % des patients atteints de CHC.29 Long interspersed nucleotide element 1 (LINE-1) est un autre médiateur de rétrotransposition hautement actif.L'hypométhylation de LINE-1 a été trouvée dans l'ADN de 66,7 % des échantillons de sérum de CHC et a été associée à une récidive précoce et à une faible survie après résection radicale.29 L'hyperméthylation est un processus génétique courant qui joue un rôle unique dans le développement de la cirrhose du foie et du CHC.30 En revanche, l'hydroxyméthylation est un processus de déméthylation qui induit la réactivation et l'expression des gènes, et la détection du produit 5-hydroxyméthylcytosine (5-hmC) dans ce processus peut être utilisée pour identifier une tumeur.La méthylation et l'hydroxyméthylation de l'ADNc sont associées à la tumorigenèse et peuvent contribuer au dépistage précoce du CHC.Dans une étude de 2554 sujets, 31 5-hmC à l'échelle du génome ont été trouvés dans des échantillons d'ADNc, et 32 ​​gènes ont été identifiés en comparant les séquences de 5-hmC chez les patients HCC et les groupes à haut risque tels que ceux atteints de maladies chroniques.Modèles diagnostiques des maladies du foie.et cirrhose.Ce modèle était supérieur à l'AFP pour distinguer le HCC du tissu non tumoral.
Des mutations dans les régions codantes peuvent conduire à des anomalies transcriptionnelles, qui peuvent conduire à des changements dans les séquences protéiques et, finalement, au cancer.Les variants mononucléotidiques sont des marqueurs génomiques importants pour le dépistage précoce des tumeurs en raison de leur fiabilité tissulaire élevée et de leur spécificité tumorale et tissulaire élevée.De nombreuses études liées au HCC utilisant le séquençage de nouvelle génération (NGS) pour le séquençage de l'exome et du génome entier du cancer ont identifié des gènes cellulaires mutés communs tels que TP53 et CTNNB1, ainsi que plusieurs, notamment ARID1A, MLL, IRF2.Les nouveaux gènes, ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 et JAK1 présentent des taux de mutation modérés. L'analyse de la fonction des gènes mutants suggère que des altérations du remodelage de la chromatine, de la transduction du signal Wnt/β-caténine et JAK/STAT, de la voie du cycle cellulaire P53, des modificateurs épigénétiques, des voies du stress oxydatif, de la voie PI3K/AKT/MTOR et de la voie RAS/RAF/ La voie MAPK kinase joue un rôle crucial dans l'oncogenèse du CHC.32,33 Dans une étude dans laquelle des mutations associées aux tumeurs ont été détectées, Huang et al ont découvert que la fréquence des mutations associées aux tumeurs dépendantes de l'ADNct était de 19,5 % et la spécificité était de 90 %. .34 De plus, les patients qui ont subi une invasion vasculaire étaient plus susceptibles d'avoir des mutations de l'ADNct (P = 0,041) et une survie sans récidive plus courte (P <0,001). L'analyse de la fonction des gènes mutants suggère que des altérations du remodelage de la chromatine, de la transduction du signal Wnt/β-caténine et JAK/STAT, de la voie du cycle cellulaire P53, des modificateurs épigénétiques, des voies du stress oxydatif, de la voie PI3K/AKT/MTOR et de la voie RAS/RAF/ La voie MAPK kinase joue un rôle crucial dans l'oncogenèse du CHC.32,33 Dans une étude dans laquelle des mutations associées aux tumeurs ont été détectées, Huang et al ont découvert que la fréquence des mutations associées aux tumeurs dépendantes de l'ADNct était de 19,5 % et la spécificité était de 90 %. .34 De plus, les patients qui ont subi une invasion vasculaire étaient plus susceptibles d'avoir des mutations de l'ADNct (P = 0,041) et une survie sans récidive plus courte (P <0,001).L'analyse de la fonction des gènes mutants suggère que les changements dans le remodelage de la chromatine, la signalisation Wnt/β-caténine et JAK/STAT, la voie du cycle cellulaire P53, les modificateurs épigénétiques, les voies du stress oxydatif, la voie PI3K/AKT/MTOR et la voie RAS/RAF/MAPK kinase jouent un rôle critique dans la tumorigenèse du CHC.32,33 Dans une étude qui a révélé des mutations associées à la tumeur, Huang et al.ont constaté que la fréquence des mutations associées aux tumeurs dépendantes de l'ADNct était de 19,5 % et la spécificité était de 90 %..34 кроме того, у пцциеtesp. .34 En outre, les patients présentant une invasion vasculaire présentaient davantage de mutations de l'ADNc (P=0,041) et une survie sans maladie plus courte (P<0,001).L'analyse fonctionnelle des gènes mutants a révélé le remodelage de la chromatine, la signalisation Wnt/β-caténine et JAK/STAT, la voie du cycle cellulaire P53, les modificateurs épigénétiques, la voie du stress oxydatif, la voie PI3K/AKT/MTOR et la voie RAS/RAF/MAPK La voie des kinases joue un rôle essentiel dans l'oncogenèse du CHC. 32,33 在 一 项 检测 到 肿瘤 相关 突变 的 研究 中 , Huang 等 人 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 CTDNA 的 频率 为 19,5% , 特异性 为 90% .34 此外 , 经历 血管 侵犯 的 患者 更 有 可能 发生 CTDNA突变(P=0.041)和更短的无复发生存期(P<0.001)。 32.33 在 一 项 检测 到 相关 突变 的 研究 , Huang 等 发现 肿瘤 相关 突变 依赖于 依赖于 CTDNA 的 为 为 为 的5% , 特异性 为 90% .34 此外 经历 侵犯 的 的 更 可能 发生 CTDNA 突变 (P = 0,041) 和 和 更 更短的无复发生存期(P<0.001)。32,33 Dans une étude qui a trouvé des mutations associées à la tumeur, Huang et al.ont constaté que les mutations associées aux tumeurs dépendaient à 19,5 % de l'ADNc avec une spécificité de 90 % 34. De plus, les patients qui avaient subi une invasion vasculaire étaient plus susceptibles de développer de l'ADNc.мутация (P = 0,041) et более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001). mutation (P=0,041) et une survie sans maladie plus courte (P<0,001).Un autre gène pilote HCC commun est TP53, qui a un taux de mutation de plus de 30 %.Des études ont montré que la fréquence des mutations TP53 dans l'ADNct dans le sang et l'urine varie de 5% à 60%.35 L'étude de Johan a montré que le spectre de mutation de l'ADNct dans le CHC tardif a un taux de mutation similaire à celui du CHC précoce, y compris le promoteur TERT (51 %), TP53 (32 %), CTNNB1 (17 %), PTEN (8 %), des mutations dans AXIN1 ., ARID2, KMT2D et TSC2 (6 % chacun).36 L'oncogène β-caténine (CTNNB1) joue un rôle important dans la voie de signalisation Wnt.Le coactivateur de transcription CTNNB1 peut favoriser l'expression des gènes, ce qui peut conduire à la prolifération cellulaire, à l'inhibition de l'apoptose et à l'angiogenèse.CTNNB1 peut également interagir avec TERT pour induire la transformation des hépatocytes.33 Le promoteur TERT est fréquemment muté dans certaines tumeurs solides.Les altérations du TERT, l'un des premiers changements génétiques dans la transformation maligne du CHC, peuvent entraîner une réactivation de la télomérase dans les hépatocytes cirrhotiques et peuvent favoriser la prolifération et prévenir le vieillissement.Des mutations du promoteur 33-37 TERT ont été signalées chez 59 à 90 % des patients présentant des nodules hépatiques prolifératifs et un CHC précoce et sont associées à la survie.38
Les modifications du nombre de copies (CNA) sont un sous-type important de mutations somatiques.La recherche a montré que le fardeau répandu et focal de l'ANC est une signature génomique capable de prédire l'infiltration et l'exclusion immunitaires des tumeurs dans certains types de cancer.39 Signalisation d'infiltration active, activité cytolytique élevée, inflammation sévère et marqueurs génétiques associés à la présentation de l'antigène dans le CHC.L'analyse du tableau de données des polymorphismes mononucléotidiques chez 477 sujets a révélé une faible charge sur le SNC.En revanche, les tumeurs chromosomiquement instables avec une charge étendue élevée de CNA ont montré des signes de rejet immunitaire et ont été associées à la prolifération, à la réparation de l'ADN et au dysfonctionnement de TP53.Xu et al.ont montré que le groupe HCC avait des scores CNA plus élevés que le groupe maladie hépatique chronique.40 En utilisant le séquençage du génome entier d'une seule cellule, il a été découvert que les CNA apparaissaient tôt dans l'hépatocarcinogenèse et restaient relativement stables pendant la progression tumorale.41 Chung et al.ont constaté que les niveaux de cfDNA étaient significativement élevés chez les patients atteints de CHC et que les CNA à l'échelle du génome dans le cfDNA étaient un marqueur pronostique indépendant important chez les patients atteints de CHC traités par sorafenib.42 Les patients avec une charge CNA plus élevée étaient plus susceptibles d'avoir une progression de la maladie et de mourir que ceux avec une charge CNA plus faible.Ollerich et al.ont constaté que l'indice d'instabilité du nombre de copies (CNI) peut être utilisé pour évaluer le CNA dans le cfDNA des patients atteints de cancer.Ils ont noté que les patients atteints d'un cancer avancé avaient des scores CNI significativement plus élevés qu'un groupe témoin, qui évalue la réponse des patients à la chimiothérapie et à l'immunothérapie systémiques.43 Ces résultats suggèrent que les CNA trouvés dans les échantillons de biopsie liquide peuvent servir d'indicateurs pronostiques chez les patients atteints d'un cancer avancé.HCC sur le fond de la thérapie systémique.
Actuellement, les méthodes utilisées pour détecter l'ADNct peuvent être divisées en méthodes ciblées et non ciblées.En bref, les méthodes ciblées telles que la réaction en chaîne par polymérase numérique (dPCR), la PCR numérique BEAMing, le système de mutation réfractaire d'amplification-PCR, Capp-Seq et Tam-Seq sont très sensibles aux gènes prédéfinis.Les méthodes hors cible telles que le séquençage du génome entier et le NGS offrent une vue complète de l'ensemble du paysage génomique.44 Par rapport aux panels cibles, le séquençage du génome entier peut détecter non seulement les mutations ponctuelles et les insertions, mais également les réarrangements et les variations du nombre de copies.pronostic, et le CTC et le cfDNA sont de bons indicateurs qui peuvent être utilisés pour la surveillance dynamique du CHC.45 De plus, l'analyse cfDNA peut être plus utile pour détecter le CHC.Yan et al.ont montré que le cfDNA dans le plasma des patients atteints de CHC était significativement plus élevé que chez les patients atteints de fibrose hépatique et les témoins sains.Comparé à l'AFP, le ctDNA devrait être un meilleur marqueur de dépistage du CHC précoce.46 Dans une étude prospective de 47 biopsies liquides qui ont testé le cfDNA et les protéines dans une population, elles se sont avérées efficaces pour différencier les patients atteints de CHC des patients sans CHC.Dans un suivi de 331 patients normaux et AFP-négatifs à l'échographie, la sensibilité et la spécificité du cfDNA pour le diagnostic du CHC étaient de 100 % et 94 %, respectivement, de sorte que l'ADNc pouvait détecter le CHC chez les individus séropositifs asymptomatiques pour l'AgHBs.Dans l'étude Yeo48, une fréquence élevée (92,5%) d'hyperméthylation du promoteur RASSF1A a été retrouvée chez les patients atteints de CHC.De plus, Xu et al.ont créé un modèle de diagnostic pour prédire le CHC à l'aide d'un panel de marqueurs de méthylation spécifiques avec une spécificité et une sensibilité de 90,5 % et 83,3 %, respectivement.Le panel permet de distinguer les patients atteints de CHC des patients atteints d'autres maladies du foie, ce qui est mieux que l'AFP.Ils ont également constaté que les témoins normaux dont le test était positif pouvaient présenter des facteurs de risque de CHC, tels qu'une infection par le VHB ou des antécédents de consommation d'alcool.25 Nous émettons l'hypothèse que les facteurs à haut risque de CHC peuvent favoriser l'hyperméthylation du cfDNA, qui contribue ensuite à la progression du CHC, et donc que le cfDNA peut jouer un rôle clé dans le dépistage des groupes à haut risque.Caï et al.résument la gamme complète des mutations de l'ADNct et offrent une stratégie robuste pour évaluer la charge tumorale chez les patients.49 Cette stratégie peut identifier la tumorigenèse une médiane de 4,6 mois avant le changement d'imagerie et a montré des performances diagnostiques supérieures par rapport aux biomarqueurs sériques AFP, AFP-L3 et PIVKA-II.La valeur diagnostique du test ADNc a été démontrée lorsque l'évaluation d'image n'est pas disponible, de sorte que le test ADNc est utile dans le diagnostic du CHC précoce dans les groupes à haut risque.Récemment, les scientifiques ont utilisé la technologie NGS pour analyser des indicateurs de variation génétique multivariée (y compris la 5-hydroxyméthylcytosine, le motif 5′, la fragmentation, la trace de nucléosome, HIFI) dans 3204 échantillons cliniques et cfDNA.50 Les modèles HIFI revalidés avec trois trains, tests et ensembles de tests indépendants ont montré une discrimination stable et fiable entre les populations HCC et non HCC avec une sensibilité de 95,79 % et 95,42 % dans les tests et ensembles de tests spécifiques au HCC, respectivement.Les sexes étaient respectivement de 95,00 % et 97,83 %.La valeur diagnostique de la méthode HIFI est supérieure à celle de l'AFP pour distinguer le CHC de la cirrhose.De plus, le ctDNA est également utilisé dans le traitement chirurgical.Atsushi et al.ont déterminé les taux sériques préopératoires d'ADNc chez les patients atteints de CHC et ont constaté que le taux de récidive et le taux de métastases extrahépatiques dans le groupe positif à l'ADNc étaient significativement plus élevés que dans le groupe négatif à l'ADNc, et que les taux d'ADNc étaient significativement corrélés.avec progression tumorale.51 Étant un biomarqueur très sensible, le ctDNA peut prédire la capacité du HCC à envahir les vaisseaux.Wang et al.a effectué le séquençage du génome entier de 46 patients atteints de CHC, et l'analyse multivariée a montré que la valeur seuil de la fréquence allélique du variant d'ADNc pour l'invasion dans les microvaisseaux est de 0,83 %, la sensibilité de 89,7 % et la spécificité de 80,0 %.un facteur de risque indépendant d'invasion microvasculaire dans le CHC résécable, ce qui suggère que l'ADNc peut aider à guider un traitement optimal.En conclusion, l'ADNct est pleinement impliqué dans la survenue et le développement du CHC et peut être utilisé pour le dépistage précoce, l'évaluation chirurgicale et le suivi de la maladie.
Les CTC sont des cellules malignes dérivées de tumeurs primaires ou de métastases qui métastasent dans la circulation sanguine.Les cellules tumorales sécrètent des métalloprotéinases matricielles (MMP), qui décomposent la membrane basale, permettant aux cellules tumorales de pénétrer directement dans les vaisseaux sanguins et lymphatiques.Cependant, la plupart des CTC sont rapidement éliminés par les anoïkis, les attaques immunitaires ou le stress de cisaillement.53 La transition épithéliale-mésenchymateuse (EMT) permet aux CTC d'être facilement isolés du tissu tumoral primaire, d'envahir les capillaires et d'acquérir une survie, des métastases, une invasion et une résistance aux médicaments considérablement améliorées.Des études ont montré qu'il existe une profonde hétérogénéité entre les différentes cellules tumorales dans les tumeurs métastatiques primaires.Ainsi, l'analyse CTC peut conduire à une compréhension globale de l'hétérogénéité des cellules tumorales.54
Les marqueurs spécifiques des CTC associés au HCC comprennent le glypicane-3 (GPC3), le récepteur de l'asialoglycoprotéine (ASGPR), la molécule d'adhésion des cellules épithéliales (EpCAM) et les marqueurs associés aux cellules souches tels que CD44, CD90, 55 et la molécule d'adhésion intercellulaire 1 (ICAM1).) .56 Le marqueur GPC3 est une protéine ancrée dans la membrane cellulaire utilisée en clinique pour l'analyse pathologique et la caractérisation du CHC.57 L'expression de GPC3 est plus fréquente dans les cellules tumorales HCC avec une différenciation intermédiaire et faible et favorise la migration extrahépatique ;de plus, la présence de CTC GPC3+ indique un CHC métastatique.58 ASGPR est une protéine transmembranaire exprimée uniquement à la surface des hépatocytes et est fortement exprimée dans le CHC bien différencié.EpCAM est l'une des protéines associées à la membrane les plus couramment utilisées pour capturer les CTC.L'EpCAM a été identifiée comme un marqueur de surface des cellules du CHC présentant des caractéristiques de cellules souches,59 en corrélation avec diverses caractéristiques clinicopathologiques du CHC, telles que l'invasion vasculaire, les niveaux d'AFP évalués et le stade avancé du cancer du foie à l'hôpital de Barcelone (BCLC).Le phénotype 60 CTC EMT est hautement métastatique.54 processus EMT dans le CTC favorisent les métastases HCC.L'expression de marqueurs EMT tels que la vimentine, la torsion, la liaison des doigts de zinc E-box (ZEB) 1, ZEB2, l'escargot, la limace et la E-cadhérine a été étudiée dans les CTC dérivés du foie de patients atteints de CHC.58 Le système CanPatrol™ développé par Cheng [61] a classé les CTC en trois sous-groupes phénotypiques basés sur des marqueurs principalement exprimés : le phénotype épithélial (EpCAM, CK8/18/19), le phénotype mésenchymateux (vimentine, enroulé) et les phénotypes mixtes.Chez 176 patients, le CTC total était supérieur à l'AFP pour différencier le CHC d'une maladie hépatique bénigne.Les valeurs de l'ASC pour le CTC total, l'AFP et le CTC et l'AFP totaux combinés étaient de 0,774 (IC à 95 %, 0,704-0,834), 0,669 (IC à 95 %, 0,587-0,750) et 0,821 (IC à 95 %, 0,756-0,886). ).), respectivement.La classification CTC basée sur l'EMT peut prédire le diagnostic de CHC, la récidive précoce, les métastases et un temps global plus court.
Actuellement, les procédés de détection des CSC comprennent des procédés physiques et des procédés biologiques.Les méthodes physiques, souvent appelées enrichissement basé sur les propriétés biophysiques, dépendent principalement des propriétés physiques du CSC, telles que la taille, la densité, la charge, la mobilité et la déformabilité.Selon les propriétés physiques, il existe différentes méthodes telles que les systèmes basés sur la filtration, la diélectrophorèse, etc. Cette dernière, également connue sous le nom d'enrichissement basé sur l'immunoaffinité, est principalement basée sur la liaison antigène-anticorps puisque la méthode utilise des anticorps contre des biomarqueurs spécifiques de la tumeur. tels que EpCAM, ASGPR, le récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2), l'antigène spécifique de la prostate (PSA), la pancytokératine humaine (P-CK) et la carbamoyl phosphate synthase 1 (CPS1).62 Un autre type, appelé méthode sans enrichissement, utilise la cytométrie en flux pour différencier les CTC des leucocytes en fonction d'un rapport et d'une taille nucléaire/cytoplasmique plus élevés.Actuellement, le seul test approuvé par la FDA pour la détection des CTC est le système Cell-Search™, qui utilise le marqueur de surface cellulaire EpCAM. Cependant, la détection de CTC basée sur des marqueurs combinés pourrait augmenter le taux de positivité.54 Un mélange d'anticorps contre ASGPR et CPS1 a atteint un taux de détection de CTC de 91 % chez les patients atteints de CHC.63 Zhang et al ont utilisé une puce CTC avec des anticorps contre ASGPR, P -CK et CPS1, et ont différencié les patients atteints de CHC de ceux atteints d'une maladie hépatique bénigne ou d'un cancer non lié au CHC à un taux de 100 %.64 Une étude de Wang a détecté des CTC EpCAM+ chez 60 % des 42 patients atteints de CHC et a trouvé des corrélations significatives et le nombre de CTC au stade TNM.65 Guo et al ont constaté qu'un score PCR dérivé de CTC était élevé chez 125/171 (73%) patients dont le niveau d'AFP était <20 ng/mL avec une sensibilité de 72,5% et un spécificité de 95,0 %, contre 57,0 % et 90,0 % pour l'AFP à un seuil de 20 ng/mL.66 La combinaison d'AFP et de CTC peut améliorer la détection du CHC.45 On pense que les CTC ont un avantage sur l'AFP dans le dépistage précoce des groupes à haut risque de CHC. Cependant, la détection de CTC basée sur des marqueurs combinés pourrait augmenter le taux de positivité.54 Un mélange d'anticorps contre ASGPR et CPS1 a atteint un taux de détection de CTC de 91 % chez les patients atteints de CHC.63 Zhang et al ont utilisé une puce CTC avec des anticorps contre ASGPR, P -CK et CPS1, et ont différencié les patients atteints de CHC de ceux atteints d'une maladie hépatique bénigne ou d'un cancer non lié au CHC à un taux de 100 %.64 Une étude de Wang a détecté des CTC EpCAM+ chez 60 % des 42 patients atteints de CHC et a trouvé des corrélations significatives et le nombre de CTC au stade TNM.65 Guo et al ont constaté qu'un score PCR dérivé de CTC était élevé chez 125/171 (73%) patients dont le niveau d'AFP était <20 ng/mL avec une sensibilité de 72,5% et un spécificité de 95,0 %, contre 57,0 % et 90,0 % pour l'AFP à un seuil de 20 ng/mL.66 La combinaison d'AFP et de CTC peut améliorer la détection du CHC.45 On pense que les CTC ont un avantage sur l'AFP dans le dépistage précoce des groupes à haut risque de CHC.Cependant, la détection combinée des CTC basée sur des marqueurs peut augmenter le pourcentage de résultats positifs.54 Un mélange d'anticorps anti-ASGPR et CPS1 a atteint un taux de détection des CTC de 91 % chez les patients atteints de CHC.63 Zhang et al.a utilisé une CTC-Chip avec des anticorps contre ASGPR, P-CK et CPS1, et a également distingué les patients atteints de CHC de ceux atteints d'hépatopathie bénigne ou non-HCC à un taux de 100%.частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых уровень АФП был <20 нг/мл с чувствительностью 72,5% и специфичность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% для АФП при пороговом уровне 20 нг/мл.66 Комбинация АФП и ЦОК может улучшить обнаружение ГЦК.45 Считается, что ЦОК имеют преимущество перед АФП при раннем скрининге групп. fréquence et nombre de CTC au stade TNM.65 Guo et al ont constaté que la PCR dérivée des CTC était élevée chez 125/171 (73 %) patients qui avaient des taux d'AFP <20 ng/mL avec une sensibilité de 72,5 % et une spécificité de 95,0 % contre 57,0 % et 90,0 % pour l'AFP à un seuil de 20 ng/mL.66 La combinaison d'AFP et de CTC peut améliorer la détection du CHC.45 Les CTC sont considérés comme ayant un avantage sur l'AFP dans le dépistage précoce groupes.à haut risque de CHC.Cependant, la détection combinée des CTC basée sur des marqueurs peut augmenter le pourcentage de résultats positifs.54 Un mélange d'anticorps anti-ASGPR et CPS1 a atteint un taux de détection de CTC de 91 % chez les patients atteints de CHC.63 Zhang et al.ont utilisé des puces CTC avec des anticorps contre ASGPR, P-CK et CPS1 et ont distingué les patients atteints de CHC des maladies hépatiques bénignes et des non-HCC avec 100 %.64 L'étude de Wang a identifié 60 % des CTC EpCAM+ chez 42 patients atteints de CHC et a trouvé une corrélation significative entre l'incidence et le nombre de CTC au stade TNM. 65 Guo 等 人 发现 , 在 AFP 水平 <20 ng / ml 的 125/171 (73%) 名 患者 中 , CTC 衍生 的 PCR 评分 升高 , 敏感性 为 72,5% , 特异性 为 95,0% , 而 AFP 在 截止值为20 ng/mL 时的特异性为57.0% 和90.0%。 65 Guo 等 人 发现 在 在 在 水平 <20 ng / ml 的 125/171 (73%) 名 患者 , , CTC 衍生 PCR 评分 , 敏感性 为 为 72,5% , 为 95,0% , AFP 在 截止 截止 截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 为 20NG / ml 时 的 特异性 为 57,0% 和 90,0%。65Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% и специфичностью 95,0%, в то время как АФП на уровне отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. ont constaté que chez 125/171 (73%) patients avec des niveaux d'AFP <20 ng/mL, les valeurs de PCR dérivées de CTC étaient élevées avec une sensibilité de 72,5% et une spécificité de 95,0%, tandis que l'AFP était au seuil de spécificité était de 20 ng/mL.ml était de 57,0 % et 90,0 %.66 La combinaison de l'ORP et du CTC améliore la détection du CHC.45 On pense que les CTC sont supérieurs à l'AFP dans le dépistage précoce des populations à haut risque de CHC.Ainsi, pour les groupes CTC-positifs et à haut risque de CHC, le test CTC doit être systématiquement associé à l'échographie et à la détection de l'AFP.Cependant, les CTC sont considérés comme des facteurs prédictifs importants de métastases tumorales et de récidive, et la détection des CTC n'est pas recommandée de manière indépendante comme outil de diagnostic.62 Par conséquent, le CTC peut servir de meilleur biomarqueur prédictif que les autres marqueurs actuellement utilisés. Zhou et al ont constaté que les patients avec un nombre élevé de CTC EpCAM+ et de lymphocytes T régulateurs présentaient un risque plus élevé de développer une récidive de CHC que ceux avec un faible nombre de CTC, avec un taux de récurrence de 66,7 % contre 10,3 % (P < 0,001).67 Une étude similaire a été rapportée par Zhong et al.68 En outre, Qi a constaté que 101 des 112 patients (90,81 %) atteints de CHC, y compris ceux à un stade précoce de la maladie, étaient positifs pour les CTC et que de très petits nodules de CHC étaient détectés après 3 à 5 mois de suivi. Zhou et al ont découvert que les patients avec un nombre élevé de CTC EpCAM+ et de cellules T régulatrices présentaient un risque plus élevé de développer une récidive de CHC que ceux avec un faible nombre de CTC, avec un taux de récurrence de 66,7 % contre 10,3 % (P < 0,001).67 A une étude similaire a été rapportée par Zhong et al.68 De plus, Qi a découvert que 101 des 112 patients (90,81 %) atteints de CHC, y compris ceux à un stade précoce de la maladie, étaient positifs pour les CTC et que de très petits nodules de CHC étaient détectés après 3 à 5 mois de suivi. Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток риск развития рецидива ГЦК был выше, чем у пациентов с низким количеством ЦОК, с коэффициентом рецидивов 66,7% против 10,3% (P <0,001)67. Zhou et al ont constaté que les patients avec des CTC EpCAM+ élevés et des cellules T régulatrices avaient un risque plus élevé de récidive du CHC que ceux avec des CTC faibles, avec un taux de récurrence de 66,7 % contre 10,3 % (P < 0,001)67.Une étude similaire a été réalisée par Zhong et al.68. En outre, Qi a découvert que 101 patients sur 112 (90,81 %) atteints de CHC, y compris ceux atteints d'une maladie précoce, avaient des CTC, et que de très petits nodules de CHC étaient détectés après 3 à 5 mois de suivi. Zhou 等 人 发现 , 与 CTC 数量 较 少 的 患者 相比 , EPCAM + CTC 和 调节性 T 细胞 数量 升高 的 患者 发生 HCC 复发 的 风险 更 高 , 复发率 为 为 66,7% 和 10,3% (P <0,001)。 Zhou 等 人 发现 与 与 CTC 数量 少 的 患者 相比 , EPCAM + CTC 和 T 细胞 数量 的 患者 发生 HCC 复发 风险 更 , 复发率 分别 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为3% ( p <0,001)。。。。。。。。。。。。。。。 Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ и регуляторных Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством ЦОК, с частотой рецидивов 66,7% и 10,3% соответственно (P <0,001). Zhu et al.ont constaté que les patients avec des CTC EpCAM+ élevés et des lymphocytes T régulateurs avaient un risque plus élevé de récidive du CHC par rapport aux patients avec moins de CTC, avec des taux de récurrence de 66,7 % et 10,3 %, respectivement (P < 0,001).Une étude similaire a été rapportée par Zhong et al.68 En outre, Qi a constaté que 101 des 112 patients atteints de CHC (90,81 %), y compris les patients atteints d'une maladie précoce, avaient des résultats CTC positifs et ont trouvé de très petits nodules de CHC après 3 visites.Observation jusqu'à 5 mois.Ils ont également trouvé des CTC chez 12 patients atteints d'une infection chronique par le VHB et ont trouvé de petites tumeurs HCC dans les 5 mois chez 2 patients positifs au CTC.69 Ainsi, les CTC peuvent être utilisés pour prédire le CHC, 70 mais ils peuvent être utilisés plus régulièrement comme biomarqueurs prédictifs.
Comme le cfDNA, le cfRNA est libéré dans la circulation sanguine par divers systèmes.Ces molécules du sang périphérique représentent le tissu cancéreux d'origine.Par rapport aux marqueurs détectés par des méthodes non invasives, les cfRNA sont plus dynamiquement régulés, spécifiques aux tissus et abondants dans l'environnement extracellulaire.L'importance et la valeur diagnostique de 71 miARN (miARN) dans le CHC ont été rapportées dans de nombreuses études.Les miARN sont des ARN endogènes non codants (ARNnc) qui régulent diverses activités biologiques moléculaires en inhibant la traduction des ARN messagers cibles (ARNm).Les miARN sont situés dans des corps apoptotiques encapsulés dans des exosomes, mais ils peuvent également se lier de manière stable aux protéines sériques et aux lipides du sang périphérique et peuvent être utilisés pour évaluer le CHC.Les microARN sont impliqués dans la régénération du foie, le métabolisme des lipides, l'apoptose, l'inflammation et le développement du CHC.72 Les miARN oncogènes tels que miR-21, miR-155 et miR-221 sont bien connus dans le CHC.En particulier, miR-21 joue un rôle clé dans la synthèse du collagène dans la matrice extracellulaire et la fibrose et favorise l'hépatocarcinogenèse en activant les cellules souches hématopoïétiques.72,73 Les miARN suppresseurs de tumeurs dans le CHC comprennent les miARN-122, les miARN-29, la famille Let-7 et la famille des miARN-15.La famille Let-7 se compose de nombreux miARN suppresseurs de tumeurs qui ciblent la famille RAS.La famille miR-15 comprend miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 et miR-497, qui ont des séquences complémentaires pour certains ARNm.De plus, les ARN longs non codants (ARNlnc) et les ARN circulaires (ARNcir) sont également importants pour le dépistage précoce du CHC.Les lncARN représentent la classe la plus large d'ARNnc, y compris les ARNnc de type ARNm, et sont impliqués dans la pathogenèse de nombreuses maladies humaines.Les LncRNA jouent un rôle régulateur dans le microenvironnement hépatique et les maladies hépatiques chroniques.74 Les CircRNAs sont également une classe de ncRNAs avec de multiples fonctions dans la régulation de l'expression des gènes.Récemment, les circARN ont été considérés comme des outils de diagnostic du CHC.
L'ARN libre circulant a une stabilité remarquable, y compris une résistance à la température, au pH et à la RNase, ce qui rend l'isolement de l'ARNfn du sang périphérique moins fastidieux à l'aide de méthodes standard de purification d'ARN.Les méthodes les plus couramment utilisées incluent NGS, microarray et RT-qPCR.Le NGS permet de mesurer les microARN dans tout le génome.Cependant, cette méthode est coûteuse et l'analyse n'est pas standardisée.En revanche, la RT-qPCR est peu coûteuse, amplifie rapidement les acides nucléiques et offre de nombreux avantages tels qu'une plus grande sensibilité, une plus grande précision, une plage dynamique plus large et nécessite moins d'échantillons.Les microréseaux sont une autre méthode utilisée pour la détection des miARN basée sur l'hybridation sensible et spécifique des miARN cibles avec des sondes d'ADN complémentaires, 75 mais l'analyse des données des microréseaux prend du temps.
Il a été rapporté que miR-122 et Let-7 circulants étaient potentiellement utiles pour diagnostiquer le CHC à un stade précoce dans les groupes à haut risque, les marqueurs chez les patients atteints de nodules précancéreux associés au VHB et le CHC à un stade précoce.76 Cai et al.ont constaté que les membres de la famille Let-7 (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 et miR-199a/b) sont à risque de maladie chronique CHC chez les patients atteints d'hépatite.La famille Let-7 peut servir de biomarqueur de substitution efficace pour prédire le développement du CHC dans les groupes à haut risque associés à l'hépatite C chronique. 77 miR-122 a une précision diagnostique élevée pour détecter le CHC précoce chez les patients atteints de cirrhose du foie.78 Le sérum circulant MiR-107 a également été évalué dans les premiers stades du CHC, 79 et a montré un bon potentiel dans les populations à haut risque.Zhou et al ont rapporté qu'un panel de miARN (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a et miR-801) peut différencier le CHC de l'hépatite B chronique (CHB) et de la cirrhose la sensibilité était de 79,1 % et 75 %, et la spécificité de 76,4 % et 91,1 %, respectivement.80 Dans le CHC lié au VHB, nous avons constaté que les niveaux de miR150 étaient significativement réduits par rapport à ceux des patients atteints de VHB chronique sans CHC (sensibilité 79,1 %, spécificité 76,5 %).-224 était élevé dans le CHC par rapport aux témoins sains, et les analyses de sous-groupes ont montré des niveaux plus élevés chez les patients atteints de CHC associé au VHB.Les patients atteints de cirrhose et de CHC associés à l'hépatite B ont identifié un classificateur d'ARNsi contenant sept ARNsi exprimés de manière différentielle qui peuvent détecter le CHC chez différents témoins ;La plage d'ASC lors du dépistage précoce est meilleure que celle des volontaires AFP.Ils ont découvert que quatre miARN (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p et miR-365a-3p) pouvaient distinguer les patients atteints de CHC des patients sans CHC.Cinq miARN surexprimant (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p et miR-148a-3p) sont considérés comme des infections potentielles par le VHB dans le CHC, la cirrhose et les biomarqueurs CHB, en particulier miR-34a-5p peut être un biomarqueur de la cirrhose du foie,85 et peut être un biomarqueur potentiel pour le dépistage précoce du CHC dans les populations à haut risque.L'ARNlnc le plus étudié dans le CHC est fortement activé dans le cancer du foie (HULC).D'autres études ont montré que les HULC circulant chez les patients atteints de CHC peuvent être utilisés comme marqueur de diagnostic car cet ARNlnc est fortement régulé positivement chez les patients atteints de CHC par rapport aux individus en bonne santé.71,86 Parmi les autres lnRNA, LINC00152 est considéré comme le meilleur lncRNA de diagnostic en raison de son AUC élevée, de sa sensibilité et de sa spécificité.86 Dans une étude, l'expression sanguine périphérique de LINC00152 a progressivement augmenté des témoins sains normaux aux patients atteints d'HCB et de cirrhose, et a finalement été la plus élevée dans le CHC.Des études de l'expression de circSMARCA5 dans le plasma de patients atteints de CHC ont montré une diminution progressive de l'expression dans le CHC allant de l'hépatite à la cirrhose et aux lésions précancéreuses.87 L'analyse des courbes ROC a confirmé le potentiel de ces circARN pour distinguer les patients atteints d'hépatite ou de cirrhose du foie de ceux atteints de CHC, en particulier ceux dont les taux d'AFP sont inférieurs à 200 ng/mL.En outre, Zhu a analysé 13 617 ARN cycliques dans des échantillons de plasma de patients atteints de CHC associé au VHB et a confirmé que 6 ARN cycliques étaient exprimés différemment dans le CHC et la cirrhose associée au VHB, suggérant que les ARNc pourraient être bénéfiques.marqueurs pour le dépistage précoce des groupes à haut risque tels que ceux associés à une maladie du foie, les patients atteints de sclérose.88
Les exosomes sont des vésicules membranaires de 40 à 160 nm de diamètre ;plusieurs vésicules intracellulaires fusionnent avec la membrane cellulaire et sont libérées dans la matrice extracellulaire.Ils contiennent de nombreux composants actifs, notamment des lipides, des protéines, de l'ARN et de l'ADN, et jouent un rôle clé dans la communication entre les cellules, qu'elles soient HCC ou non HCC.89,90 Les exosomes régulent la progression du CHC en activant les fibroblastes et les cellules étoilées des hépatocytes, les cellules immunitaires, les hépatocytes normaux et les cellules du CHC.91 Dans le microenvironnement tumoral, les cellules tumorales produisent un grand nombre d'exosomes qui sont transportés des cellules cancéreuses vers les cellules immatures, qui à leur tour sont impliquées dans l'oncogenèse, la dégradation et la signalisation cellulaire.92 Des études ont montré que les exosomes peuvent transférer des oncogènes aux cellules normales au cours de processus pathologiques, ce qui peut être l'un des mécanismes de l'invasion tumorale et des métastases.93 Le rôle des exosomes dans la progression du cancer peut être dynamique et spécifique au type de cancer, 89 Les exosomes peuvent être internalisés par des cellules adjacentes ou distantes pour réguler plusieurs gènes cibles dans les cellules réceptrices qui peuvent être impliquées dans la communication intercellulaire des ions et les interactions du microenvironnement cellulaire, ils peuvent médiation de la signalisation cellulaire et du métabolisme.94 Les caractéristiques et les changements dynamiques des molécules de cargaison des exosomes reflètent directement les caractéristiques et les changements dynamiques des cellules tumorales parentales,95 qui sont également à la base de l'utilisation des exosomes dans le diagnostic et le pronostic du cancer, ainsi que pour prédire la réponse individuelle au traitement anticancéreux ..96
Les méthodes de laboratoire traditionnelles pour isoler et analyser les exosomes sont complexes, en plusieurs étapes et prennent du temps, y compris l'ultracentrifugation, la filtration, la chromatographie d'exclusion de taille, la purification par immunoaffinité, le transfert Western, le dosage immuno-enzymatique (ELISA), la PCR et l'analyse de flux.des systèmes miniaturisés et des plates-formes de laboratoire sur puce utilisant la micro/nanotechnologie sont largement développés pour une isolation in situ rapide et pratique des exosomes.L'analyse de suivi des nanoparticules (NTA) est une méthode largement utilisée pour caractériser la taille et la concentration des exosomes, y compris des méthodes telles que les nanoparticules magnétiques et les polyhydroxyalcanoates.Les méthodes microfluidiques et électrochimiques peuvent également détecter rapidement les exosomes avec des rendements élevés.
Les protéines exosomales sont des marqueurs importants pour le diagnostic du CHC.Dans l'étude Arbelaiz, le niveau de protéine de liaison 98 RasGAP SH3 (G3BP) et de récepteur d'immunoglobuline polymère (PIGR) était significativement élevé dans les exosomes dérivés de HCC, et l'efficacité combinée putative des deux protéines était supérieure à celle de l'AFP.La surcharge en fer est un facteur important contribuant au développement du CHC.Tseng a rapporté que l'hepcidine pourrait jouer un rôle clé dans la résistance au CHC.99 Les exosomes dérivés des sérums de patients atteints de CHC avaient un nombre de copies significativement plus élevé de variants d'ARNm de l'hepcidine que leurs homologues sains, ce qui suggère que l'hepcidine pourrait être un nouveau biomarqueur diagnostique du CHC.La protéine 14-3-3ζ dans les exosomes produits par 100 HCC peut réduire l'activation, la prolifération et la différenciation des cellules T et peut induire la transformation des cellules T en cellules T régulatrices, entraînant une déplétion des cellules T.101 Ceci est étayé par plusieurs études portant sur l'évasion tumorale de la surveillance immunitaire, 102 qui peuvent contribuer à la tumorigenèse du CHC.
En plus de la présence d'ecRNA dans le plasma ou le sérum, les exosomes enrichis en ARN peuvent être utilisés pour la stadification non invasive en temps réel dans le dépistage précoce des tumeurs et pour déterminer l'évolution de la tumeur et la réponse au traitement.Le niveau de miARN-21 exosomal dans le sérum sanguin du groupe HCC était 2,21 fois plus élevé que dans le groupe CHB, et dans le groupe HCC, il était 5,57 fois plus élevé que dans la population en bonne santé.Dans l'étude de Wang, les exosomes ont augmenté de manière significative le CHC par rapport aux patients cirrhotiques avec des valeurs d'ASC de 0,83 (IC à 95 % 0,74-0,93) et 0,94 (IC à 95 % 0,88-1,00).104 Les données obtenues ont élucidé l'implication de molécules de cargaison exosomales spécifiques dans la régulation de l'oncogenèse et de la progression du CHC.105 L'expression sérique de miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 et ​​miR-26a est cohérente.et les métastases, et les niveaux de miR21 étaient beaucoup plus élevés chez les patients HCC que chez les témoins sains et aussi chez les patients HCC.102 LncRNA avait une valeur diagnostique potentielle dans le HCC.Des études ont montré que les exosomes dérivés du sérum de patients HCC ont des niveaux significativement plus élevés de LINC00161, LINC000635 et lncRNA activés par le facteur de croissance transformant-β que chez les patients sans HCC, et ces lncRNA sont fortement associés au stade TNM et au volume tumoral.110 Conigliaro et al.Il a été constaté que les exosomes CD90 + expriment des niveaux élevés d'ARNlncH19, ce qui augmente de manière significative la libération du facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) et la production de récepteurs VEGF-R1, stimulant ainsi l'angiogenèse.93 Les circARN sont un autre type d'ARNnc exosomiques - exprimés à des niveaux inférieurs mais stables d'une espèce à l'autre, les circARN présentent également une spécificité pour le type de cellule, le type de tissu, le stade de développement et l'activité régulatrice.111 circRNAs sont des biomarqueurs diagnostiques pour le cancer précoce et peu invasif.112 Des essais cliniques récents ont montré que la spécificité des miARN individuels dans la prédiction du CHC n'est pas idéale.Par conséquent, la détection complexe utilisant plusieurs tests (par exemple, miR-122 et miR-48a en combinaison avec l'AFP) peut améliorer l'identification du CHC précoce et la différenciation du CHC de la cirrhose.100
Les patients atteints d'HCB et de cirrhose du foie constituent le groupe à haut risque le plus courant de développer un CHC.Pour les groupes à haut risque, une fois qu'une réponse virologique soutenue a été obtenue, une stratégie de surveillance rentable basée sur le risque de CHC doit être développée, et le dépistage précoce est la clé pour améliorer le diagnostic et le traitement du CHC avec un rapport coût-efficacité élevé2 ..Les méthodes de dépistage précoce du cancer présentent de nombreuses limites : des méthodes efficaces de dépistage précoce n'ont pas été développées pour la plupart des types de cancer et l'observance est généralement faible.Par rapport aux méthodes traditionnelles de dépistage précoce, la technologie de biopsie liquide présente des avantages évidents : facilité d'échantillonnage, détection du panrac, bonne reproductibilité des échantillons et réponse efficace à l'hétérogénéité tumorale.Compte tenu du rapport coût-efficacité des méthodes associées à la biopsie liquide, leur utilisation dans le dépistage du CHC n'a pas été testée en routine.Malgré les progrès de la détection précise au niveau moléculaire, la biopsie liquidienne est coûteuse pour détecter le CHC chez les patients cibles, ce qui limite son utilisation généralisée par rapport à des procédures d'imagerie spécifiques telles que l'échographie et l'imagerie par résonance magnétique.113,114 Cependant, une étude antérieure a montré que la biopsie liquide présentait un avantage significatif en termes d'années de vie ajustées sur la qualité (QALY).115 Les avantages de la biopsie liquide dans le carcinome précoce de l'estomac et du nasopharynx ont également été démontrés.116,117 L'opinion actuelle est que la biopsie liquide peut compléter les biomarqueurs sériques et le dépistage radiologique dans la détection et le diagnostic des tumeurs.117 118
Selon la littérature actuelle, la technologie de biopsie liquidienne a montré une sensibilité et une spécificité significativement plus élevées dans le dépistage précoce des groupes à haut risque de cancer du foie.Quel que soit le type de biopsie liquidienne, elle peut distinguer le CHC des personnes à haut risque sans CHC, ce qui suggère l'importance d'un dépistage précoce car les différences entre les personnes à haut risque et les personnes en bonne santé sont évidentes.L'ADNc a une courte demi-vie et peut être utilisé pour détecter le CHC, de sorte que tout changement dans l'ADNc dérivé de la tumeur peut fournir des preuves concrètes en temps réel de la progression tumorale, en particulier pour les petites tumeurs.Un niveau élevé d'ADNc indique le développement et la propagation du cancer et est un indicateur précoce de progression et de récidive.De plus, sur la base des résultats de l'ADNct, les patients peuvent recevoir un traitement et un suivi individualisés.119 Des sites de méthylation spécifiques peuvent être un meilleur marqueur que l'AFP pour l'identification précoce du CHC et des nodules cirrhotiques.Dans les cas résécables de CHC, des niveaux élevés d'ADNc indiquent une invasion microvasculaire et une récidive postopératoire et des métastases.Les changements dans le nombre de copies sont associés à la survie des patients atteints de CHC.On peut supposer que l'évaluation de l'ADNc peut être impliquée dans le traitement global du CHC, et l'ADNc peut servir d'indicateur efficace de la modulation thérapeutique.Des marqueurs basés sur des mutations génétiques spécifiques dans l'ADNct ont été adoptés par des directives cliniques pour prédire l'efficacité et surveiller la résistance aux médicaments.Le test ctDNA peut être l'outil de biopsie liquide le plus utile pour le dépistage précoce.Les CTC jouent également un rôle clé dans le dépistage précoce des groupes de CHC à haut risque.Divers marqueurs de CTC associés au CHC revêtent une importance particulière dans l'apparition, le développement et la récurrence du CHC.En tant que vésicules membranaires, les exosomes sont impliqués dans les communications intercellulaires, en particulier dans les cellules HCC.Les microARN circulants sont stables dans le sang et peuvent donc être plus utiles pour le dépistage précoce du CHC.Progressivement, des protéines exosomales et des exosomes riches en ARN ont été découverts et leur efficacité prédictive pour le CHC a été confirmée.Fait intéressant, différentes étiologies de HCC peuvent également être associées à différentes mutations, nous pouvons donc sélectionner différents biomarqueurs pour un dépistage précoce en fonction de différentes étiologies de HCC.120
Cependant, les techniques actuelles de biopsie liquidienne sont discutables en termes de stabilité et ne peuvent pas effectuer indépendamment un dépistage précoce ou une surveillance du CHC, mais peuvent toujours compléter le dépistage et le diagnostic individuels.121 En tant que forme de biopsie liquide, la détection et l'imagerie de l'ADNct, du CTC, du cfRNA et de l'AFP associée aux exosomes ou PIVKA-II ont des applications prometteuses dans le diagnostic précoce et le pronostic du CHC.Cependant, le mécanisme exact de la libération de ctDNA dans le sang reste à élucider.Révéler les propriétés biologiques de base de l'ADNct peut faciliter son utilisation comme marqueur.La petite quantité d'ADNc dans la circulation et les exigences strictes de manipulation des échantillons sont des défis pour la mise en œuvre clinique de la détection d'ADNc dans le CHC.De plus, les mutations génétiques n'ont pas de caractéristiques spécifiques permettant une identification précise des agents cancérigènes.Étant donné que plusieurs variantes génétiques et somatiques sont également présentes dans les tissus normaux, les mutations génétiques identifiées par biopsie liquidienne peuvent être d'une utilité limitée dans le dépistage précoce du CHC.122 Les limites des cibles génétiques utiles bien définies et des biomarqueurs qui aident à différencier l'ADNc de l'ADN non tumoral sont les problèmes les plus importants dans l'utilisation de l'ADNc.manque d'utilité des marqueurs sensibles et spécifiques pour la détection des CTC.Seules des cellules viables avec un potentiel métastatique ont été trouvées, et la combinaison optimale de marqueurs enrichis en CSC n'était pas claire.L'isolement des CTC pour la culture et l'évaluation de leurs profils mutationnels est également une tâche difficile.En raison de problèmes d'identification, d'isolement et de purification des exosomes, le mécanisme moléculaire spécifique n'est toujours pas clair, et les études précédentes sur le mécanisme des exosomes et du HCC n'ont pas été approfondies, et la façon dont les miARN, les lncARN et les protéines sont triés en exosomes , et il n'est pas clair si l'absorption d'exosomes est un processus de type spécifique.L'utilisation des exosomes pour le diagnostic et le traitement du CHC est encore au stade préclinique.Le manque de normalisation des procédures de biopsie liquide, telles que le type de tubes utilisés pour prélever le sang, le volume sanguin, le stockage et la détection des échantillons, l'isolement et l'enrichissement, peut empêcher leur utilisation dans la pratique clinique de routine en raison des différences de pratiques entre les centres médicaux.L'efficacité de la biopsie liquide dans le dépistage précoce, le diagnostic, l'évaluation de l'efficacité et la prédiction du CHC reste à explorer, en particulier pour les groupes à haut risque.La technologie de biopsie liquide a un grand potentiel et devrait être largement utilisée dans la pratique clinique du cancer du foie dans un proche avenir.
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Statistiques mondiales sur le cancer 2020 : GLOBOCAN estime l'incidence et la mortalité de 36 types de cancer dans 185 pays.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.doi : 10.3322/caac.21660
2. Siège de la Commission nationale de la santé.Critères pour le diagnostic et le traitement du cancer primitif du foie (édition 2022) [J].Tourillon des maladies cliniques du foie, 2022, 38(2): 288-303.doi : 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Lignes directrices pour le diagnostic et le traitement du carcinome hépatocellulaire (édition 2019).Cancer du foie.2020;9(6):682-720.doi: 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Lignes directrices de pratique clinique pour le carcinome hépatocellulaire : Société japonaise pour les maladies du foie, 2017 (JSH-HCC 4e lignes directrices), mise à jour 2019.Réservoir de maladies du foie.2019;49(10):1109–1113.doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Biopsie liquide dans une maladie hépatique chronique.Anne Hépato.2021;20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Biopsie liquide du cancer du sein : une revue ciblée.Arch Pathol Lab Med.2021;145(6):678–686.doi : 10.5858/arpa.2019-0559-RA
7. Kanval F., Singal AG Surveillance du carcinome hépatocellulaire : meilleures pratiques actuelles et orientations futures.Gastroentérologie.2019;157(1):54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Association européenne de recherche L, Organisation européenne R, C Therapeutics.Recommandations cliniques EASL-EORTC : traitement du carcinome hépatocellulaire.J Héparine.2012;56(4):908–943.doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.Analyse combinée de l'AFP et du HCCR-1 comme marqueurs sérologiques utiles dans le petit carcinome hépatocellulaire : une étude de cohorte prospective.Marque Dis.2012;32(4):265–271.doi : 10.3233/DMA-2011-0878
10. Chen S, Chen H, Gao S, et al.Expression différentielle du microARN-125b plasmatique dans les maladies hépatiques associées au virus de l'hépatite B et potentiel diagnostique du carcinome hépatocellulaire induit par le virus de l'hépatite B.Réservoir de la maladie du foie.2017;47(4):312-320.doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Biologie et importance de l'alpha-foetoprotéine dans le carcinome hépatocellulaire.Foie int.2019;39(12):2214–2229.doi : 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Lignes directrices cliniques pour le traitement du carcinome hépatocellulaire dans la région Asie-Pacifique : mise à jour 2017.Organisation internationale des maladies du foie.2017;11(4):317–370.doi : 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Valeur diagnostique du PIVKA-II sérique seul ou en association avec l'AFP chez les patients chinois atteints de carcinome hépatocellulaire.Marque Dis.2021;2021:8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Biopsie liquidienne humorale non plasmatique du cancer du poumon non à petites cellules : au plus près de la tumeur !cellule.2020;9(11).doi : 10.3390/cells9112486
15. Mader S, Pantel K. Biopsie liquide : situation actuelle et perspectives d'avenir.Traitement Oncol Res.2017;40(7-8):404-408.doi: 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Biopsie du cancer en milieu liquide : un outil de diagnostic multimodal en oncologie clinique.L'Adv Med Oncol.2018;10:1758835918794630.doi : 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Acides nucléiques dans le plasma humain.CR Séances Soc Biol Fil.1948;142(3-4):241-243.
18. Moulière F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Détection avancée de l'ADN tumoral circulant par analyse de la taille des fragments.La science traduit la médecine.2018;10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Longueur du fragment d'ADN tumoral circulant.Gènes PLOS.2016;12(7):e1006162.doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. ADN tumoral circulant : un biomarqueur prometteur dans la biopsie du cancer à base de liquide.tumeur cible.2016;7(30):48832–48841.doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Détection de l'ADN tumoral circulant aux stades précoces et tardifs des tumeurs malignes humaines.La science traduit la médecine.2014;6(224):224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Biopsie liquide pour l'analyse prédictive mutationnelle du cancer solide : le point de vue d'un pathologiste.J Biotechnologie.2019;297:66-70.doi : 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Détection précoce des tumeurs par dépistage de l'ADN plasmatique circulant : hype ou espoir ?droit clinique belge.2020 ;75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Effet du virus de l'hépatite et du vieillissement sur la méthylation de l'ADN dans l'hépatocarcinogenèse humaine.Histopathologie.2010;25(5):647–654.doi : 10.14670/HH-25.647


Heure de publication : 23 septembre 2022